一次性全封闭集菌培养器的配套使用仪器

细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物和不受其他有害因素的影响。一次性全封闭集菌培养器细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作去设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室。常用设施设备:1,超大工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外观式三大类。2,无菌操作间:一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒好的无菌物品等。3、操作间:普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4、洗刷消毒间:烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5、分析间:显微镜、计算机打印机等。具体步骤编辑基本概述编辑:细胞的生长需要营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基。培养基按其物理状态可分为液体培养基和固体培养基。液体培养基用于大规模的工业生产以及生理代谢等基本理论的研究工作。液体培养基中加入一定的凝固剂(如琼脂)或固体培养物(如麸皮、大米等)便成为固体培养基。固体培养基为细胞的生长提供了一个营养及通气的表面,在这样一个营养表面上生产的细胞可形成单个菌落。因此,固体培养基在细胞的分离、鉴定、计数等方面起着相当重要的作用。从多细胞生物中分离所需要细胞和扩增获得的细胞以及对细胞进行体外改造,观察,必须解决细胞离体培养问题,同微生物细胞培养的难易相比,比较困难的是来自多细胞生物的单细胞培养,特别是动物细胞的培养。细胞培养泛指所有体外培养,其含义是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境等特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长。细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域,成为zui重要的基础科学之一。一、细胞培养器复苏:1.把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。2.把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。3.把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。一次性全封闭集菌培养器4.标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到37℃的5%CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。5.根据细胞增长速度2-3天换一次培养基。二、细胞培养器传代:1.培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。2.把原有培养基吸掉。3.加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。4.细胞都变圆后加入等体积的含血清的培养基终止消化。5.用移液枪吹打细胞,让细胞悬浮起来。6.把细胞吸到10ml或15ml的离心管中,1000转离心5分钟。7.倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。8.根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。二、细胞培养器传代:1.培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。2.把原有培养基吸掉。3.加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。4.细胞都变圆后加入等体积的含血清的培养基终止消化。5.用移液枪吹打细胞,让细胞悬浮起来。6.把细胞吸到10ml或15ml的离心管中,1000转离心5分钟。7.倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。8.根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。


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